D. Yu. Ryazantsev, E. M. Çudinova, L. Yu. Kokaeva, S. N. Elanski, P. N. Balabko, G. L. Belova, S. K. Zavriev
Fitopatogen göbələk Colletotrichum coccodes, antraknoz və yumru qara ləkə olaraq bilinən kartof və pomidorlarda təhlükəli xəstəliklərə səbəb olur. Morfoloji xüsusiyyətlərinə görə, onları digər mikroorqanizmlərin yaratdığı xəstəliklərdən ayırmaq çox vaxt çətindir; yaşıl pomidor meyvələrində xəstəlik asemptomatik ola bilər, yalnız yetişmiş qırmızı meyvələrdə özünü göstərir. Patogenin sürətli və dəqiq diaqnozu üçün real vaxt rejimində bir PCR test sistemi təklif olunur. Bir test sistemini inkişaf etdirmək üçün Rusiyanın müxtəlif bölgələrində kartof kök yumrularından təcrid olunmuş 45 C. coccodes suşlarının qliserol trifosfat dehidrogenaz geninin nükleotid ardıcıllığı müəyyən edilmişdir.
Alınan nəticələrə və GenBank verilənlər bazasında mövcud olan digər növlərin oxşar ardıcıllığının analizinə əsasən, C. coccodes üçün növlərə xüsusi astarlar və zond dizayn edilmişdir. Yaradılan test sisteminin spesifikliyini yoxlamaq üçün PCR, pomidor və kartof bitkiləri (Fusarium oxysporum, F. verticillium, Phomopsis phaseoli, Alternaria alternata, Helminthosporium solani, Colletotrichum coccodes Phellinus ferrugineovelutinus, Stemphylium vesicarium, Helminthosporium solani, Phomopsis phaseoli, Neonectria radicicola, Rhizoctonia solani, Penicillium sp., Cladosporium fulvum, C. cladosporioides). Colletotrichum coccodes DNA-nın varlığı 15-20 ərəfəsində müəyyən edildi, digər növlər isə 27 dövrdən sonra aşkar edildi və ya aşkarlanmadı. Test sistemi, analiz edilən PCR qarışığında C-nin 40 ng / mm0.01-dən çox olan DNT konsentrasiyalarını etibarlı şəkildə aşkar etməyə imkan verir. İnkişaf etdirilmiş test sistemindən istifadə edərək göbələk xəstəlikləri əlamətləri olan pomidor yarpaqlarında və xəstəliyin xarici əlamətləri olmayan kartof kök yumrularında C. kokodların olması araşdırılmışdır. Göbələk infeksiyası əlamətləri olan yarpaqlar Krasnodar Bölgəsindəki iki fərqli sahədən, kök yumruları - Kostroma, Moskva, Kaluga, Nijni Novgorod bölgələrindəki sahələrdən toplanmışdır. Krasnodar Bölgəsində C. coccodes DNA'sı olan bir pomidor yarpağı tapıldı; bu patogenin DNT-nin əhəmiyyətli dərəcədə olması, Kostroma, Moskva, Kaluga bölgələrində yetişən 3 kök yumru nümunəsində aşkar edilmişdir.
Giriş
Colletotrichum cinsinin göbələkləri taxıl, tərəvəz, otlar, çoxillik meyvə və giləmeyvə bitkilərini təsir edən təhlükəli fitopatogenlərdir. Bu cinsin hər yerdə yayılmış növlərindən biri olan Colletotrichum coccodes (Wallr).
Hughes, antraknoz və kartof və pomidorun qara ləkəsinin törədicisidir və Solanaceae ailəsinin bir sıra digər bitkilərinin xəstəliklərinə səbəb olur. alaq otları (Dillard, 1992). C. kokkodlar bitkinin bütün yeraltı hissələrini, kök əsaslarını, yarpaqlarını və meyvələrini təsir edir (Andrivon et al., 1998; Johnson, 1994). İnfeksiya edilmiş kartof kök yumrularının qabığında, aydın olmayan kənarları olan boz ləkələrin inkişafı müşahidə olunur, üzərində qara nöqtəli sporulyasiya və mikrosklerotiya görünür. Saxlama zamanı yumru məzmunu olan xoralar kök yumrularının sellülozunda əmələ gələ bilər, yəni. xəstəlik antraknoz fazasına girir, bununla birlikdə son dərəcə nadirdir.
Eyni zamanda, antraknoz əlamətləri (kiçik qara nöqtəli dəri xoraları) pomidor meyvələrində tipikdir. Yarpaqlarda C. kokod simptomları ümumiyyətlə sarı toxuma ilə haşiyələnən tünd qəhvəyi ləkələr kimi görünür (Johnson, 1994).
Kök yumrularında qara ləkənin inkişafı onların görünüşünü pozur, bu da xüsusilə yuyulmuş qırmızı qabıqlı kartof satarkən özünü göstərir. Peel aşındırma həddindən artıq buxarlanmaya və artan saxlama itkisinə səbəb olur (Hunger, McIntyre, 1979). Digər bitki orqanlarının zədələnməsi həm açıq, həm də qapalı yerdə qeyd olunan məhsul itkisinə səbəb olur (Johnson, 1994; Tsror et al., 1999). C. kokodların yaratdığı xəstəliklər, Rusiya da daxil olmaqla dünyanın demək olar ki, bütün kartof istehsal edən bölgələrində yaygındır (Leesa, Hilton, 2003; Belov et al, 2018). Bu coxodlara qarşı mövcud funqisidlərin təsirinin qeyri-kafi olması və davamlı növlərin olmaması səbəbindən bu xəstəliklərin idarəsi çətindir (Oxu, Gizlət, 1995).
C. coccodes aşısı toxum kök yumrularında davam edə bilər (Oxuyun, Gizlə, 1988; Johnson və digərləri, 1997), pomidor toxumları (Ben-Daniel və digərləri, 2010), uzun müddət torpaqda, bitki zibillərində yaşayırlar (Dillard, 1990) ; Dillard, Cobb, 1993) və alaq otlarında (Raid, Pennypacker, 1987). Bir sıra müəlliflərin əsərləri (Oxuyun, Gizlə, 1988; Barkdoll, Davis, 1992; Johnson et al., 1997; Dillard, Cobb, 1993), kartof və pomidorlarda xəstəliyin inkişafının böyük ölçüdə toxumdakı aşığın olub-olmamasından asılı olduğunu göstərdi. torpaq. Buna görə xəstəlikdən itkiləri minimuma endirmək üçün toxum materialında, torpaqda, anbarda qoyulmuş toxum kartof kök yumruları və pomidor toxumlarında göbələyin yayılmalarına (kəmiyyət daxil olmaqla) diaqnoz qoymaq lazımdır. Torpaq və bitki materialındakı morfoloji diaqnostika yalnız digər növ göbələklərdə olan mikrosklerotiyanın olması ilə həyata keçirilə bilər.
Kök yumrularının əlamətləri Helminthosporium solani göbələyinin yaratdığı gümüş qaysaqla çox oxşardır. Colletotrichum coccodes və Helminthosporium solaninin təmiz bir kultura ayrılması kifayət qədər çətindir və qida mühitində yavaş böyüməsi səbəbindən çox vaxt tələb olunur. Colletotrichum kokodlarını tez bir zamanda təyin etmək üçün instrumental diaqnostik metodlardan istifadə etmək lazımdır. Ən əlverişli üsul polimeraz zəncirvari reaksiya (PCR) və onun modifikasiyası - real vaxt PCR-dir. Hal-hazırda, İngilis tədqiqatçılar tərəfindən (Cullen et al., 2002) rDNA'nın ITS1 bölgəsi üçün hazırlanmış bir test sistemi Avropada və ABŞ-da istifadə olunur. Rus izolyatlarının analizində istifadəsi yaxşı nəticələr göstərmişdir (Belov və digərləri, 2018). Bununla birlikdə, C. kokodlar olduqca dəyişkəndir və tək bir DNT ardıcıllığından aşkarlanması yanlış mənfi nəticələrə səbəb ola bilər. Daha etibarlı bir diaqnoz üçün bir neçə növə məxsus DNT ardıcıllığını analiz etmək lazımdır, bununla əlaqədar olaraq C. coccodes-i gliseraldehid-3-fosfat dehidrogenaz geninin ardıcıllığı ilə təyin etməyə imkan verən orijinal bir test sistemi yaratdıq.
Materiallar və metodlar
Yaradılan test sistemlərinin səmərəliliyini və spesifikliyini qiymətləndirmək üçün müəlliflər tərəfindən pomidor yarpaqları və meyvələri, kartof kök yumruları xəstə nümunələrindən təcrid olunmuş 15 növ göbələkdən təmiz kulturadan istifadə etdik (Cədvəl 1). Təcrid üçün göbələk infeksiyası əlamətləri olan bitkilərin orqanları, kol başına bir orqandan çox olmamaqla, götürülmüşdür.
Bir qabığı olan bir yumru dilimi, bir pomidor meyvəsi və təsirlənmiş bir yarpaq durbin mikroskopunun altına qoyuldu, bundan sonra miselyum, sporlar və ya bir toxuma parçası kəskin kəsici iynə ilə Petri qabındakı agar mühitinə (wort agar) köçürüldü. İzolyatlar, test borularında 4 ° C-də aqar meylinin üzərində saxlanıldı.
Analiz üçün nəzərdə tutulmuş göbələk xəstəlikləri əlamətləri olan pomidor yarpağı nümunələri toplandıqdan dərhal sonra (tarlada)% 70 etil alkoqolda, DNT izolyasiyasına qədər saxlanıldıqları yerlərdə yerləşdirildi. Kartof kök yumruları laboratoriyaya çatdırıldı, onlardan soyuldu (2 × 1 sm parça) və –20 ° C-də donduruldu. DNT izolyasiyasına qədər dondurulmuş vəziyyətdə saxlanılır.
DNT izolyasiyası üçün təmiz göbələk kültürləri maye noxud mühitində yetişdirildi. Mantarın miselyumu maye mühitdən çıxarıldı, filtr kağızında quruduldu, maye azotda donduruldu, homogenləşdirildi, CTAB tamponunda inkubasiya edildi, xloroformla təmizləndi, izopropanol və 0.5 M kalium asetat qarışığı ilə çökdü və 2% spirtlə iki dəfə yuyuldu. Nəticədə DNT deiyonize suda həll edildi və –70 ° C-də saxlanıldı (Kutuzova et al., 20). DNT konsentrasiyası Qubit 2017-də (Qiagen, Almaniya) cüt zolaqlı DNT üçün HS DNA miqdar dəsti istifadə edilərək ölçüldü. Alkolizə edilmiş və dondurulmuş nümunələr maye azotda tritüre edildi, sonra yuxarıda göstərildiyi kimi DNT ekstraktı həyata keçirildi (saf göbələk mədəniyyətlərinin miselyumu üçün).
Cədvəl 1. İstifadə olunmuş göbələk növlərinin mənşəyi
Göbələk adı | Bitki, orqan | Seçim yeri |
---|---|---|
Colletotrichum coccodes 1, C. cocccodes 2, C. cocccodes 3, Ilyonectria crassa, Rhizoctonia solani | kartof yumru | Kostroma bölgəsi, 1-ci tarla nəslinin kartof yumruları, Red Scarlett sortu |
Colletotrichum kokodları 4 | kartof yarpağı | Rep. Mari El, Yoshkar-Ola |
Helmintosporium solani | kartof yumru | Magadan bölgəsi, pos. Çadır, kartof yumru |
Cladosporium fulvum | pomidor yarpağı | Moskva bölgəsi, böyük meyvəli pomidor |
Alternatura tomatophila | pomidor meyvəsi | Ümumrusiya Tədqiqat Bitki Mühafizəsi İnstitutunun mikologiya və fitopatologiya laboratoriyasının əməkdaşları tərəfindən təhvil verildi |
Fusarium verticillium, Phomopsisphaseoli, Alternaria alternata, Phellinus ferrugineovelutinus, Stemphylium vesicarium, Cladosporium cladosporioides, Acrodontium luzulae, Penicillium sp. | pomidor meyvəsi | Krasnodar Bölgəsi, Krymsky rayonu, keyfiyyətli Krem |
Fusarium oxysporum | buğda kökü | Moskva bölgəsi |
PCR bir DTprime gücləndiricisi (DNA-Technology) üzərində aparıldı. PCR üçün orijinal astarlar və gliserol trifosfat dehidrogenaz geninin növlərə spesifik bölgəsi üçün bir prob istifadə edilmişdir: irəli astar Coc70gdf -TCATGATATCATTTCTCTCACGGCA, ters astar Coc280gdr - TACTTGAGCATGTAGGCCTGGG1. Astarlar 213 bp bölgəni gücləndirir.
Reaksiya 50 ng ümumi DNT (yarpaqlar və kök yumruları analiz edildikdə) və 10 ng (saf göbələk mədəniyyətlərindən DNT analiz edilərkən) aldı. Reaksiya qarışığı (35 μl) bir parafin təbəqəsi ilə iki hissəyə ayrıldı: altındakı (20 μl) 2 μl 10 × reaksiya tamponu (750 mM Tris-HCl, pH 8.8; 200 mM (NH4) 2SO4; 25 mM MgCl2;% 0.1 Tween- 20), 0.5 mM hər deoksinukleotid trifosfat, hər astardan 7 pmol və 4 pmol hidrolize olunan flüoresan prob; yuxarı hissədə 1 μl 10 × PCR tampon və 1 U Taq polimeraz var idi.
Qarışığın parafinlə ayrılması boruları 5 ° C temperaturda uzun müddət saxlamağa və 10 ° C-dən yuxarı bir temperaturda 80 dəqiqə qızdırdıqdan sonra PCR üçün isti bir başlanğıc təmin etməyə imkan verir. PCR aşağıdakı proqrama uyğun olaraq həyata keçirilmişdir: 94.0 ° C - 90 s (1 dövr); 94.0 ° C - 30 s; 64.0 ° C - 15 s (5 dövr); 94.0 ° C - 10 s; 64.0 ° C - 15 s (45 dövr); 10.0 ° C - saxlama.
Nəticələr və müzakirə
Qliserol trifosfat dehidrogenaz geninin ardıcıllığı Rusiyanın müxtəlif bölgələrində yarpaq, gövdə, kartof kök yumruları və pomidor meyvələrindən (Kutuzova, 45) təcrid olunmuş 2018 ştammda müəyyən edilmişdir. Bütün ştammların tədqiq olunan ardıcıllığı iki nukleotid ilə fərqlənən 2 qrupa bölündü. KY496634 və KY496635 nömrələri altında hər iki qrupun nümayəndələrinin nükleotid ardıcıllığı GenBank-da yatırılır.
Kok70gdf, coc280gdr və bunların əsasında hazırlanmış cocgdz probu BLAST proqramı istifadə edilərək yoxlanıldı (www.ncbi.nlm.nih.gov/blast) GenBank verilənlər bazasında mövcud olan Colletotrichum cinsinin və digər orqanizmlərin qliserol trifosfat dehidrogenaz geninin bütün ardıcıllığında.
Astarlar və zond üçün olduqca homoloji olan digər orqanizmlərin DNT bölgələri tapılmadı.
Test sisteminin həssaslığı müxtəlif konsentrasiyalı C. coccodes DNA, antraknozla yoluxmuş bir kartof yarpağından DNT (Mari El, 2017 növü Red Scarlett) və qara ləkədən təsirlənən kök yumrularının qabığı olan nümunələr (Kostroma bölgəsində toplanmış, müxtəliflik Red Scarlett, Cədvəl 2). Kök yumruları və kartof yarpaqlarında DNT olduğunu təsdiqləmək üçün C. kokod suşları onlardan təmiz kulturaya ayrıldı.
Test sisteminin həssaslıq analizinin nəticələri göstərir ki, onun PCR qarışığındakı ümumi miqdarı 0.05 ng-dən çox olduğu zaman nümunədə C. coccodes DNA-nın varlığını uğurla diaqnoz etmək üçün istifadə edilə bilər. Bu, aşkar etmək üçün kifayətdir, çünki bir sklerotiyada orta hesabla 0.131 ng və bir sporda təxminən 0.04 ng DNT var (Cullen et al., 2002). İngilis qrupu tərəfindən hazırlanmış test sistemi (Cullen və digərləri, 2002) bənzər bir həssaslıq göstərdi (34 ng DNA-da eşik dövrü 0.05 və 37 ng-də 0.005).
Bütün hallarda C. kokkodları olan təbii nümunələrin təhlili nümunədə mövcudluğunu etibarlı şəkildə aşkar etməyə imkan verdi (Cədvəl 2). DNT izolyasiyası üçün təklif olunan metod, təbii bitki nümunələrinin analizinə də tətbiq edilmişdir.
Cədvəl 2. Gerçək zamanlı PCR üçün Colletotrichum kokodlarının müəyyənləşdirilməsi üçün təklif olunan test sisteminin həssaslığının müəyyənləşdirilməsi
Nümunə | Nümunədəki DNT miqdarı *, ng | Eşik dövrü | C. kokkod aşkarlanması |
---|---|---|---|
Mycelium Colletotrichum kokodları | 50 | 21.3 | + |
5 | 25.7 | + | |
0.5 | 29,7 | + | |
0.05 | 33.5 | + | |
0.005 | 40 | - | |
0.0005 | 42.8 | - | |
0.00005 | - | ||
Yumru qabığı 1 | 50 | 32 | + |
Yumru qabığı 2 | 50 | 30 | + |
Yumru qabığı 3 | 50 | 31.5 | + |
Kartof yarpağı | 50 | 29.5 | + |
Qeyd. * PCR məhsullarının qarışığında.
Test sisteminin spesifikliyi 15 növ göbələkdən çıxarılan DNT nümunələrində test edilmişdir. Bütün göbələk suşları müəlliflər tərəfindən təsirlənmiş və sağlam meyvələrdən və pomidor, kartof kök yumrularının yarpaqlarından təcrid olunmuşdur; bir suş buğda kökündən təcrid olunmuşdur (Cədvəl 1). Meyvənin səthindən təcrid olunmuşlar arasında pomidor üçün patogen olmayan növlər var (məsələn, Phellinus ferrugineovelutinus).
Tədqiqatlar göstərir ki, C. coccodes DNA 20-27 eşik dövründə təsbit edildi, digər göbələk növləri də aşkarlanmadı və ya 40-cı dövrdən sonra qeyri-spesifik bir səs effektinə aid edilə bilən bir siqnal verdi (Cədvəl 3).
Cədvəl 3. Müxtəlif növ göbələklər üçün test sisteminin sınağı
Göbələk adı | Eşik dövrü |
Colletotrichum kokodları 1 | 20.9 |
C. kokkodlar 2 | 22.6 |
C. kokkodlar 3 | 23 |
C. kokkodlar 4 | 22 |
Fusarium oxysporum | > 40 |
F. verticalillium | > 40 |
Rizoctonia solani | > 40 |
Fomopsis fazeoli | > 40 |
Alternaria alternata | > 40 |
A. tomatophila | > 40 |
Helmintosporium solani | > 40 |
Phellinus ferrugineovelutinus | > 40 |
Stemhylium vesikarium | > 40 |
İlyonectria crassa | > 40 |
Kladosporium kladosporioidlər | > 40 |
C. fulvum | > 40 |
Akrodontium luzulae | > 40 |
Penicillium sp. | > 40 |
Qeyd. * Bütün nümunələrdə DNT miqdarı 10 ng idi.
İnkişaf etdirilmiş test sistemi, pomidor yarpağı nümunələrində nekrotrofik patogen simptomları olan və görünən simptomları olmayan toxum kartofu yumruları olan C. kokodları müəyyən etmək üçün istifadə edilmişdir. Tədqiqat üçün Kostroma, Moskva, Kaluga, Nijni Novgorod bölgələrində yetişən müxtəlif növ toxum kök yumruları götürdük. Analizində eşik dövrü 35-i keçməyən nümunələrdə C. coccodes DNA-nın olması əhəmiyyətli hesab edilmişdir. Bu eşik dəyəri 0.05 ng C. coccodes DNA-nın etibarlı təyini (eşik dövrü 33.5, Cədvəl 2) və faktı əsasında seçilmişdir. 40-dan yuxarı eşik dövrləri, bəzi digər göbələk növlərinin spesifik olmayan DNT diaqnozu qoyuldu. Bu yanaşma ilə Kostroma, Moskva, Kaluga bölgələrində yetişən 5 kök yumru nümunəsində və Krasnodar bölgəsinin Yeisk bölgəsindən bir pomidor yarpağında C. coccodes DNA-nın əhəmiyyətli bir varlığı təsbit edildi (Cədvəllər 4, 5).
Cədvəl 4. Kartof kök yumrularında Colletotrichum kokodlarının aşkarlanması *
Nümunə nömrəsi | Kartof müxtəlifliyi | İnkişaf yeri | C. kokkod aşkarlanması | Eşik dövrü |
---|---|---|---|---|
1 | Qırmızı Qırmızı | Kostroma bölgəsi | + | 35 |
2 | + | 35 | ||
3 | - | 38 | ||
4 | Sante | Moskva bölgəsi | + | 34 |
5 | - | |||
6 | - | 41 | ||
7 | - | 41.8 | ||
8 | + | 30 | ||
9 | Jukovski erkən | Moskva bölgəsi | - | 40.5 |
10 | - | 40.6 | ||
11 | - | |||
12 | Molly | Kaluga bölgəsi | + | 34.3 |
13 | - | 38.4 | ||
14 | Fantaziya | Kaluga bölgəsi | - | |
15 | Qala | Nijni Novqorod rayon. | - | |
16 | - |
Qeyd. * Bütün nümunələrdə DNT miqdarı 50 ng idi.
Cədvəl 5. Pomidor yarpaqlarında Colletotrichum kokodlarının aşkarlanması *
Nümunə nömrəsi | İnkişaf yeri | C. kokkod aşkarlanması | Eşik dövrü |
---|---|---|---|
1 | Krasnodar Territory, Crimean District | - | |
2 | - | ||
3 | - | ||
4 | - | 45 | |
5 | - | ||
6 | - | ||
7 | - | ||
8 | - | ||
9 | Krasnodar Territory, Yeisk District | - | 39.2 |
10 | - | 40.8 | |
11 | - | ||
12 | - | 41.6 | |
13 | - | 40 | |
14 | - | 41 | |
15 | - | 41.9 | |
16 | - | ||
17 | - | ||
18 | - | 40.3 | |
19 | - | ||
20 | - | ||
21 | + | 34.5 | |
22 | - | ||
23 | - |
* Bütün nümunələrdə DNT miqdarı 50 ng idi.
Bizim yaratdığımız test sistemi, İngilis tədqiqatçılarının (Cullen və digərləri, 2002) həssaslığı və spesifikliyi ilə inkişaf etdirdiklərindən geri qalmır və bitki nümunələrinin analizi üçün əlverişlidir. Toxum kök yumrularının analizi üçün tətbiqi xarici zədələnmə əlamətləri olmayan kök yumrularında C. kokod DNT-nin müəyyənləşdirilməsinə və yarpaqların yoluxmasını uğurla təhlil etməyə imkan verdi.
Bu günə qədər Rusiyada C. kokodların yayılması üçün kartof kök yumrularının analizi aparılmayıb. İlk tədqiqatımız göstərdi ki, Rusiya Federasiyasının müxtəlif bölgələrində yetişdirilən 16 sınaqdan keçirilmiş toxum yumrularından 5-də C. kokodlar var. Bu, kartof yumrularının qara ləkəsinin Rusiyada yayılmış bir kartof xəstəliyi olduğunu və kartof məhsulunun həcminin və keyfiyyətinin azaldılmasında rolunun az olduğunu göstərir.
Pomidor yarpaqlarının analizi nəticəsində, Krasnodar Bölgəsinin Yeisk bölgəsindən bir yarpaqda C. coccodes DNA'sının əhəmiyyətli dərəcədə olması aşkar edilmişdir. Bundan əvvəl, Cənubi Rusiyadakı İngilis test sistemindən (Cullen et al., 2002) istifadə edilən pomidor tarlaları araşdırılarkən, C. coccodes olan yarpaqlar tapıldı və bəzi sahələrdə C. coccodes ilə yoluxmuş yarpaqların yüksək bir hissəsi tapıldı (Belov və digərləri, 2018). Moskva bölgəsi olan Krasnodar və Primorsky Territories-də təmiz kokod mədəniyyətlərini təcrid etməyi bacardığımız pomidor meyvələri tapdıq. C. coccodes-in Rusiyada pomidorda indikindən daha çox yayılmış olması və zərərliliyinin də qiymətləndirilməməsi mümkündür.
Beləliklə, bu günə qədər C. kokodların kartof və pomidor üzərində geniş yayılması barədə kifayət qədər məlumat toplanmışdır.
Bu göbələyin kartof və pomidor xəstəliklərinin inkişafındakı rolunu daha yaxşı anlamaq üçün onun Rusiyada yayılmasını izləmək, torpaq və toxum infeksiyalarının rolunu və qara ləkənin saxlama zamanı itkidə rolunu öyrənmək lazımdır. PCR diaqnostikasının istifadəsi bu işi əhəmiyyətli dərəcədə asanlaşdıra bilər və hər iki test sisteminin eyni vaxtda istifadəsi analizin dəqiqliyini əhəmiyyətli dərəcədə artıracaqdır.
Bu iş 18-76-00009 saylı Rusiya Elm Fondunun bir qrantı ilə dəstəklənmişdir.
Məqalə Mycology and Phytopathology jurnalında (54-cü cild, № 1, 2020) dərc edilmişdir.